大鼠肾小球内皮细胞培养

大鼠肾小球内皮细胞分离自正常大鼠肾组织，肾小球内皮细胞是一类特殊微血管类型的细胞，能够调节肾小球过滤。它是组成过滤屏障内壁的重要部分，与肾小球的病理生理过程有关。肾小球内皮细胞能合成必要的生物活性分子，它的这种基本活性会在致炎和致血栓物质的刺激下慢慢增强。肾小球内皮细胞的受损显著影响着肾小球疾病的进展和修复过程。当肾小球损害严重时，内皮受损无法新生血管，硬化代替受损区域。肾小球内皮细胞受损后不可避免地会影响系膜细胞和上皮细胞并有可能通过它们的相互作用改变肾脏病的进展。
材料：Wistar大乳鼠，DMEM/F12培养基，胎牛血清（FBS）
方法
1.取 Wistar 大鼠断颈法处死，消毒。
2.将大乳鼠转移入超净工作台，取腰部切口迅速取出肾脏，置于盛有PBS的培养皿中清洗并除去包膜和肾蒂组织。
3.取皮质置于80目筛网上，剪碎成1-2mm3大小组织块，网下放盛有少量PBS的培养皿。
4.用玻璃注射器内芯于80目网上充分研磨组织。
5.收集 80 目网下液体转移至200 网筛上，用PBS冲洗。
7.将400目网上组织用PBS冲洗入另一培养皿中，收集置入离心管中。1500 转/分钟离心5分钟，弃去上清。
8.用10%的DF12培养基接种。