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小鼠结肠平滑肌细胞

831 人阅读发布时间:2014-04-14 08:31

平滑肌收缩是胃肠蠕动中基本的运动方式。肠炎时由于平滑肌特殊肌动蛋白的增加导致了平滑肌层的增厚。平滑肌肌动蛋白可能影响收缩力的产生,这进一步证明了炎症时的肠平滑肌细胞具有可塑性。利用肠平滑肌细胞的培养,可以帮助了解收缩、增殖和胃肠道结缔组织对平滑肌细胞的反应。
材料:新生ICR乳鼠,DMEM低糖培养基,胎牛血清
方法:
1. 乳鼠处死,消毒
2. 无菌取结肠,除去结肠周围的结缔组织和脂肪血管等组织
3. 在含有双抗的PBS中剖开结肠,反复清洗直到组织发白
4. 在离心管中剪碎组织,用0.1%胰酶和1型胶原酶消化约15min
5. 完全培养基终止消化,1500rpm离心5min
6. 用10%FBS的DMEM接种
讨论:
1结肠组织比较少,并且ICR乳鼠比较小,能用的组织很少,所以要多取几只乳鼠。
2肠子很容易污染,所以要尽量洗干净,但是时间不能太长,太长细胞状态会不好。

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