大鼠肌腱细胞

细胞描述
肌腱是肌腹两端的索状或膜状致密结缔组织，便于肌肉附着和固定。一块肌肉的肌腱分附在两块或两块以上的不同骨上，是由于肌腱的牵引作用才能使肌肉的收缩带动不同骨的运动。每一块骨骼肌都分成肌腹和肌腱两部分，肌腹由肌纤维构成，色红质软，有收缩能力，肌腱由致密结缔组织构成，色白较硬，没有收缩能力。肌腱把骨骼肌附着于骨骼。长肌的肌腱多呈圆索状，阔肌的肌腱阔而薄，呈膜状，又叫腱膜。肌腱细胞是肌腱的基本功能单位，它合成和分泌胶原等细胞外基质肌腱，维持肌腱组织的新陈代谢。肌腱细胞是一种分化程度很高的细胞，在体外培养条件下，增殖相对缓慢，尤其是经过多次传代后，肌腱细胞甚至丧失进入增殖期的能力。
试剂和材料
成年大鼠、Collagenase-2、血清、H-DMEM基础培养基
实验步骤
1、腹腔注射麻醉处死小鼠，腹部喷75%酒精消毒，无菌条件下取出大鼠肌腱组织；
2、去除肌腱组织表面的脂肪和结缔组织，PBS缓冲液清洗2次，15ml离心管中加入4ml胶原酶消化液，37℃消化2h，消化期间每10min轻轻充分吹打细胞消化液；
3、然后用200目细胞筛滤去大块组织，之后1500rpm离心5min；弃上清，沉淀细胞加6ml完全培养液重悬；
4、24h后换新鲜完全培养液继续培养。