大鼠小肠平滑肌细胞原代培养

1. 组织源：1周龄大鼠
2. 性别：雄
3. 消毒方法：PBS清洗 5次
4. 培养用液
基础培养基：DMEM (low-glucose)     添加因子：10% FBS；
5. 消化用液
成分：Collagenase-2(2%)、Collagenase-1(2%)
时间：90min
温度：37℃
6. 培养基本操作方法
a. 大鼠表面喷70%酒精消毒，无菌解剖，取肠组织；
b. 无菌PBS清洗6-8次，将肠内表面外翻；
c. 无菌PBS清洗3次，用含双抗的无菌PBS清洗2次；
d. 手术线系住两端，加入10ml酶消化液，37°消化1.5小时；
e. 充分吹打细胞消化液，使肠内表面组织、细胞尽量脱落；
f. 取出鸡肠组织，1000rpm离心5min，弃上清液，加无菌PBS清洗并离心两次；
g. 弃上清，往沉淀中加2ml完全培养基，重悬细胞后接种至6孔板，37°5%CO2培养箱中培养观察。